該模型是模擬免疫機制導致再障，還有很多不同品系小鼠免疫細胞誘發的嘗試。另外一種類型的再障與遺傳缺陷有關包括范科尼貧血（FA）、先天性角化不良（DKC）和Shwachman-Diamond綜合征（SDS），這分別是由于范科尼貧血、端粒酶相關（DKC、TERT、TERT）和SBDS基因中的遺傳性病變所致。陣發性夜間血紅蛋白尿癥（PNH）是PIG-a基因發生體細胞突變，導致造血細胞缺乏糖基磷脂酰肌醇（GPI）錨定蛋白（如CD55、CD59），臨床表現為血管內溶血、全血細胞減少和血栓形成傾向。這些基因改變包括突變或染色體截斷、增加或易位，導致包括BM在內的多個器官的功能改變。通過構建基因工程動物模型的開發有助于這類疾病的研究。

進行電離輻射照射設備是自屏蔽，對操作人及環境安全。

1.外周血常規指標測定外周血各項指標中AA模型組小鼠與對照組相比見表1，WBC降低70．2％(P<0．05)，PLT降低39．4％(P<0．05)，RBC降低19．9％(P<0．O5)，HGB降低17．0％(P<0．05)，Ret降低30．4％(P<0．05)；IR組與對照組相比，WBC降低52．1％(P<0．05)，其余指標無統計學差異。

2． 骨髓有核細胞免疫學分型每只小鼠均取左側股骨沖洗骨髓后計數BMMNC，從模型組較對照組低51．84％(P<0．05)。流式細胞儀檢測細胞表面抗原進行分型，見表2。AA模型組Gr-1 、Ter-119 、CDllb 細胞比率均低于對照組(28．52％，P<0．05；75．63％ ，P<0．05；10．22％ ，P>0．05)；AA模型組CD5 、B220 細胞比率高于對照組(51．28％，P<0．05；78．21％ ，P<0．05)。IR組與對照組相比，只有BMMNC計數和B220 細胞2項指標有顯著性差異。

1.實驗動物近交系DBA／2小鼠2只，22—24 g，雄性，由中國醫學科學院醫學實驗動物研究所提供(合格證號：SCxK(京)2005．0013)。近交系BALB／C小鼠3O只，20—22 g，雄性，由中國輻射防護研究院提供(動物許可證編號：scxK(京)2007．0001)。全價清潔飼料由北京科奧協力飼料有限公司提供。

2．試劑流式檢測用抗體均是eBioscience產品。

3．照射條件γ射線，劑量為5.0Gy，劑量率為1.1Gy／min。

4. 動物模型建立方法

4.1 動物分組取生長良好的BALB／C小鼠30只，隨機分為3組，每組10只，即對照組、照射組、AA模型組。對照組進行假照射，照射組和AA模型組進行照射。

4.2 AA動物模型制備將DBA／2小鼠(供鼠)頸椎脫臼法處死，常規消毒后，在超凈工作臺中無菌取出胸腺，置于含10％胎牛血清的RPMI-1640培養液中，除去粘附的結締組織、剪碎、輕磨、200目不銹鋼網過濾，制成單細胞懸液，臺盼藍鑒定細胞活性(在95％以上)，計數后用RPMI1640培養液調細胞濃度為5×106／ml備用。BALB／c小鼠經5.0Gy劑量γ射線全身照射，4 h后經尾靜脈輸人DBA／2小鼠的胸腺細胞懸液0.2 ml／只，含細胞數為1×106個，建立AA小鼠模型10只。對照組和照射對照組尾靜脈注入等量的RPMI1640培養液。實驗第15日檢測各項指標評估動物模型是否成功構建。

5. 實驗評價

5.1 外周血常規指標 測定模型制備至第15日，小鼠眼球取血200／A，EDTA．K3抗凝，用自動血細胞計數儀(poeH．100i，希森美康，日本)測定外周血白細胞數(WBC)、紅細胞數(RBC)、血紅蛋白含量(HGB)、血小板(PLT)等指標；取抗凝血100uL，1％煌焦油藍染色后鏡下計數網織紅細胞(Ret)。

5.2骨髓有核細胞計數處死小鼠，取小鼠左側股骨，用2 ml沖洗液沖出骨髓，在血細胞計數儀上測定骨髓有核細胞數(BMMNC)。

1、造模因素信息

模型小鼠接受高劑量電離輻射。照射條件為γ射線，劑量為5.0Gy，劑量率為1.1Gy／min。

2、實驗動物背景信息

近交系DBA／2小鼠；BALB／C小鼠。

3、研究背景

再生障礙性貧血，系多種病因引起的造血障礙，導致紅骨髓總容量減少，造血衰竭，全血細胞減少為主要表現的一組綜合征。其發病機制除與造血干細胞本身缺陷、造血微環境損傷有關外，免疫功能是再障重要的發病原因。

AA動物模型構建方法有物理方法、化學方法、免疫介導方法和混合方法。評估指標主要包括，全血細胞、網織紅細胞減少，骨髓象三系血細胞減少。

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3.張恒; 王月英; 吳紅英; 李德冠; 王小春; 路璐; 常建輝; 翟志斌; 孟愛民. 再生障礙性貧血小鼠模型的免疫學評價，中國實驗診斷, 2011,15(9):1421-1424

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